Abstract Bluetongue disease (BTD) affects various species of wild and domestic ruminants. In Mexico, the disease, caused by the bluetongue virus (BTV) is still regarded as exotic, despite the fact that antibodies have been detected on several occasions. The objective was to establish molecular techniques using a synthetic gene, including the genes NS1 and NS3 as positive controls for the diagnosis of BTV in samples of sheep from different regions of the country. A total of 320 total whole blood samples were obtained from sheep. The samples obtained were evaluated by end-point RT-PCR and real-time RT-PCR, the conditions having been established by the work group. Twelve sheep samples were found to be positive for the detection of NS1; these samples were sequenced, and a fragment of 101 base pairs was obtained. Upon alignment, were obtained identities with sequences reported in GenBank with NS1 fragments ranging from 89 % (p= 1e-12) to 98 % (p= 4e-13), corresponding to serotypes 10, 11 and 12. From these samples, two positive sheep samples were obtained using real-time PCR (RT-PCR): one from Chiapas (Chiapas breed), and the other, from Tamaulipas (Suffolk breed). The results of the RT-PCR were corroborated by CPA-SENASICA. This work provides evidence, for the first time in Mexico, of the importance of using a synthetic gene as a positive control to perform BSL-2 detection in official laboratories, which in a health emergency is of utmost importance.

Resumen La enfermedad de la lengua azul (LA) afecta diferentes especies de rumiantes silvestres y domésticos. En México, la enfermedad producida por el virus de la lengua azul (VLA), aún es reconocida como exótica, a pesar de que, en diferentes ocasiones se han detectado anticuerpos. El objetivo fue establecer técnicas moleculares usando un gen sintético que incluye los genes NS1 y NS3 como control positivo para establecer el diagnóstico del VLA en muestras de ovinos de diferentes regiones del país, mediante técnicas moleculares. Se obtuvieron 320 muestras totales de sangre completa de ovinos. Las muestras obtenidas se evaluaron mediante RT-PCR punto final y RT-PCR en tiempo real estableciendo las condiciones por el grupo de trabajo. Se encontraron 12 muestras positivas de ovinos a la detección de NS1; estas muestras se secuenciaron obteniendo un fragmento de 101 pares de bases. Al realizar el alineamiento se obtuvieron identidades con secuencias reportadas en el GenBank con fragmentos de NS1 desde 89 % (p= 1e-12) a 98 % (p= 4e-13), correspondientes a los serotipos 10, 11 y 12. De estas muestras, se obtuvieron dos muestras positivas de ovinos mediante el PCR tiempo real (PCR-tr), uno proveniente de Chiapas (raza Chiapas) y el otro de Tamaulipas (raza Suffolk). Los resultados de la PCRtr fueron corroborados por la CPA-SENASICA. Este trabajo, aporta por primera vez en México, la importancia de usar un gen sintético como control positivo, para realizar la detección en laboratorios oficiales BSL-2, lo cual en una emergencia sanitaria es de suma importancia.

Abstract The review focused on concisely presenting the contributions that INIFAP researchers have developed, directly or in collaboration with researchers from other institutions, on different aspects of the diseases that affect cattle farming in Mexico. It describes the research on viral diseases such as rabies and bovine viral diarrhea; bacterial diseases such as anaplasmosis, brucellosis, tuberculosis, paratuberculosis, leptospirosis and bovine respiratory disease, and among parasitic diseases, tick infestation and babesiosis. It identifies potential lines of research that can help mitigate the impact of diseases on production. It considers contributions on the development or adaptation of serological and molecular diagnostic techniques and the diagnosis of resistance to ixodicides. In addition, it indicates epidemiological parameters of the diseases and makes reference to the biologics generated, which include vaccines against rabies, anaplasmosis and babesiosis; bacterin against leptospirosis, and a bacterin-toxoid against pneumonia. It also discusses the evaluations of the use of BCG against tuberculosis and a new generation vaccine against brucellosis. The review concludes that the research of INIFAP in animal health must necessarily have the omic sciences as a perspective. This is the only way to complement the understanding of disease mechanisms, the development of new diagnostic techniques and the design of effective and safe vaccines. Therefore, the great challenge will be the involvement of the animal health area in the concept of "One Health".

Resumen La revisión se enfocó en presentar de manera concisa las aportaciones que investigadores del INIFAP, han desarrollado directamente o en colaboración con investigadores de otras instituciones sobre diferentes aspectos de las enfermedades que afectan a la ganadería bovina en México. Se describen investigaciones sobre enfermedades virales como la rabia y la diarrea viral bovina; bacterianas como la anaplasmosis, brucelosis, tuberculosis, paratuberculosis, leptospirosis y enfermedad respiratoria bovina; de las enfermedades parasitarias se incluye a la infestación por garrapatas y a la babesiosis. Se identifican posibles líneas de investigación que pueden coadyuvar a mitigar el impacto de las enfermedades en la producción. Se señalan aportes sobre el desarrollo o adaptación de técnicas diagnósticas de tipo serológico y molecular y se considera el diagnóstico de resistencia a los ixodicidas. Además, se indican parámetros epidemiológicos de las enfermedades y se refieren los biológicos generados que comprenden vacuna contra rabia, anaplasmosis y babesiosis; bacterina contra leptospirosis y una bacterina-toxoide contra neumonías. Asimismo, se comentan las evaluaciones del uso de BCG contra tuberculosis y una vacuna de nueva generación contra la brucelosis. En la revisión se concluye que la investigación del INIFAP en salud animal debe forzosamente tener como perspectiva las ciencias ómicas. Solo así se complementará el entendimiento de los mecanismos de las enfermedades, el desarrollo de nuevas técnicas diagnósticas y el diseño de vacunas efectivas y seguras. De modo que el gran reto será el involucramiento del área de salud animal al concepto de "Una Salud".

ABSTRACT The production of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) has good technological development; however, today, it is still necessary to make it more efficient. One way to increase efficiency is to prevent disease and improve the food conversion factor. Since previous investigations of tilapia microbiota detected a high proportion of organisms belonging to the order Actinomycetes, this study was to isolate, identify, and describe the species of bacteria microbiota belonging to the cultured Nile tilapia. These were done with Nile tilapia grown in a warm sub-humid climate during spring and summer seasons. The biopsy of different organs was performed for bacteriological culture and 16S rRNA sequencing analysis. From the 180 tissue samples, 49 isolates of the order Actinomycetes were obtained, representing ten species from seven genera: Microbacterium, Brevibacterium, Cellulomonas, Corynebacterium, Kocuria, Actinomyces, and Micrococcus. In spring, Microbacterium dominated, accounting for 74% of the total population. In the summer, lower diversity was observed, with 39% represented by Microbacterium. 16S rRNA sequencing analysis enabled the classification of Actinomyces neuii and Microbacterium lacticum as Kocuria varians and Agromyces indicus; the classification of Microbacterium imperiale as Rhodococcus and Micrococcus luteus was confirmed. No sequences of K. varians have been reported in fish. Microbacterium dextranoliticum showed high similarity to environmental samples. Here is the first study that analyzes the bacteria population in tilapia at the genetic level with an ecosystem approach, present in healthy cultured tilapia, indicating their beneficial associations with the host, making them candidates as probiotics, among other possible functions, applicable in tilapia cultivation.

Abstract The isolation of the infectious pancreatic necrosis virus (IPNV) in cell culture is currently the main diagnostic method. Although it is a reliable method, it is expensive, and the results take three weeks. This study aimed to establish and evaluate the use of a nested PCR (nPCR) for the rapid diagnosis of the IPNV, decreasing the diagnosis time and increasing its sensitivity. Therefore, two pairs of primers were designed based on Mexican sequences. The first pair (RT-PCR) amplified a 682 bp product, and the second pair (nPCR) 229 bp of the VP2 gene. Subsequently, 70 rainbow trout fry (Oncorhynchus mykiss) were infected with the virulent strain MEX3-CSM-05 at a dose of 1X105.8 TCID50/0.02 ml. From each organism, the kidney, spleen, pyloric caeca, liver, intestine, and gills were collected. To evaluate the tests, a total of 26 clinically healthy adult trouts from commercial farms in the State of Mexico were used. The detection frequency of the IPNV using RT-PCR was 87.1 % in gills, 61.4 % in liver, 61.4 % in pyloric caeca, 58.6 % in kidney, 35.7 % in the intestine, and 32.9 % in the spleen (P<0.05). RT-PCR negative samples were positive in the nPCR. Similarly, samples from the wild trout organs were positive. In conclusion, the RT-PCR was less sensitive than the nPCR, which showed a sensitivity of 100 %. Therefore, nPCR is the best option for a reliable diagnosis of the IPNV in infected and sick fish.

Resumen El aislamiento en cultivo celular es el método principal para el diagnóstico del virus de la necrosis pancreática infecciosa (VNPI). Aunque es un método confiable, resulta costoso y conlleva tres semanas en proporcionar un resultado. Para disminuir el tiempo en el diagnóstico y aumentar la sensibilidad para la detección del VNPI, el objetivo del presente estudio fue establecer y evaluar el uso de una PCR anidada (PCRa) para un diagnóstico rápido del VNPI. Para ello, se diseñaron dos pares de iniciadores basados en secuencias mexicanas. El primer par (RT-PCR) amplificó un producto de 682 pb y el segundo par (PCRa) 229 pb del gen VP2. Posteriormente, se infectaron 70 crías de truchas arcoíris (Oncorhynchus mykiss) con la cepa virulenta MEX3-CSM-05 a una dosis de 1X105.8 DICC50%/0.02 ml. De cada organismo se colectó el riñón, el bazo, los sacos pilóricos, el hígado, el intestino y las branquias. Para evaluar las pruebas, se utilizaron 26 truchas adultas clínicamente sanas de granjas comerciales del Estado de México. La frecuencia de detección del VNPI mediante RT-PCR en las branquias fue de 87.1 %, en el hígado 61.4 %, en los sacos pilóricos 61.4 %, en el riñón 58.6%, en el intestino 35.7 % y en el bazo 32.9 % (P<0.05). Las muestras negativas a la RT-PCR resultaron positivas en la PCRa. Asimismo, se mostraron positivas las muestras de los órganos de las truchas de campo. En conclusión, la RT-PCR tuvo menor sensibilidad que la PCRa, la cual mostró una sensibilidad del 100%. Por lo tanto, la PCRa es mejor para un diagnóstico confiable del VNPI en peces infectados y enfermos.

Abstract: The aim of this research was to detect rabies virus in peripheral tissues in captive vampires. Vampire bats were inoculated with 106 MICLD50 of homologous rabies virus. Bats displayed clinical signs of rabies beginning on d 8 until the 19th d post-inoculation (pi). Rabies virus antigens were found in the brain of all rabid bats. Viral RNA was detected in brain, salivary gland and tongue tissue by RT-PCR and nested PCR (nPCR). Viral genome was also detected in organs unrelated to the central nervous system. Rabies virus was not detected in saliva nor documented from any tissues without occurrence of viral antigens in the brain. Host humoral response was most pronounced via the induction of viral neutralizing antibodies (VNA) from d 8 to 20 pi, having a peak at d 14 with 0.9 IU. Antibody levels were variable, but tended to remain high after inoculation, showing significant differences to the negative control group (P=0.001). This research is one of the few recent studies focused upon Desmodus rotundus and contributes to the basic knowledge of rabies virus pathogenesis, which is required for an understanding of perpetuation in a major viral reservoir in Latin America.

Resumen: El objetivo de esta investigación fue detectar el virus de la rabia en tejidos periféricos en vampiros en cautiverio. Los vampiros se inocularon con 106 MICLD50 de un virus de rabia homólogo. Los murciélagos mostraron signos clínicos de la enfermedad desde el día 8 hasta el día 19 postinoculación (pi). Los antígenos del virus de la rabia fueron encontrados en el cerebro de todos los murciélagos infectados. El ARN viral fue detectado en cerebro, glándulas salivales y lengua por RT-PCR y PCR anidado (nPCR). El genoma viral fue también detectado en órganos no relacionados con el sistema nervioso central. El virus de la rabia no se detectó en la saliva ni se documentó en ningún tejido sin la presencia de antígenos virales en el cerebro. La respuesta humoral fue más pronunciada después de la inducción de anticuerpos neutralizantes virales (VNA) desde el día 8 a 20 pi, teniendo un pico en el día 14 con 0.9 UI. Los niveles de anticuerpos fueron variables, con tendencia a permanecer altos después de la inoculación, mostrando diferencias significativas con el grupo control negativo (P= 0.001). Esta investigación es uno de los pocos estudios recientes enfocados en Desmodus rotundus que contribuye al conocimiento básico de la patogénesis del virus de la rabia, que es necesaria para comprender la perpetuación en un importante reservorio viral en América Latina.

Abstract Most epidemiological surveillance studies of the influenza A virus (IAV) have focused on the isolation and detection of the virus in wild birds. However, there are limited descriptions of both the wild duck population and the purpose and size of the aquatic habitats where viruses have been detected or isolated. The objective of this study was to determine if a pond of 16 hectares (39.536 acres), used for agricultural and fishing purposes and visited by approximately 9000 wild migratory ducks consisting of nine different species during the wintering stay, is suitable to support the isolation of IAV. One influenza A virus was isolated from Pekin ducks used as sentinels during the wintering stay season from September 2007 to March 2008. Only one IAV subtype was isolated from 9 of the 88 samples collected from the sentinel ducks over seven months, and the molecular characterization of this isolate revealed an H6N2 virus subtype. Based on this information, it is suggested that a pond such as the one in this study provides a suitable biological setting to support the presence of IAV, but the minimum biological environment to isolate the influenza A virus is still unknown.

Abstract We analysed the genome of a low-pathogenic avian H5N2 influenza virus isolated from the faeces of experimentally infected Pekin ducks and Leghorn-type chickens to determine its origin and molecular characteristics. The complete genomic sequence was determined using a Sanger-based genome sequencing method and was subsequently characterized by phylogenetic analysis and genetic comparison. The results of this study showed that 8 genomic segments corresponded to an avian influenza virus that were related with strains isolated in Mexico. Investigation of the haemagglutinin gene revealed the presence of few basic amino acids at the cleavage site and lack of a potential N-glycosylation site at position 11. The gene encoding the PB1 protein lacked PB1-F2 and the basic polymerase gene codes for PA-X. In addition, the basic polymerase gene contained the consensus ribosomal frameshifting motif TCC TTT CGT C, which is required for the expression of the PA-X. Molecular characteristics showed that the virus has features of a low-pathogenic H5 influenza virus with the exception of a potential N-glycosylation site at position 11. The genome information for this particular virus will provide a molecular map for further in vivo studies to identify why some influenza viruses can persist in chickens for long periods of time. Such information will be useful in countries such as Mexico, where the virus has been a poultry health problem since 1994 and has the potential to evolve high pathogenicity.

Resumen Este estudio analizó el genoma de un virus de influenza aviar H5N2, aislado de heces de pollos tipo Leghorn y patos Pekín, infectados experimentalmente para conocer su origen y características moleculares. La secuencia completa del genoma del virus se obtuvo por medio del método de secuenciación de Sanger, una vez obtenida la secuencia, se caracterizó mediante comparación genética y análisis filogenético. Los resultados del análisis mostraron que los ocho segmentos del genoma están relacionados con virus aislados en México. El análisis del gen de la hemoaglutinina reveló que codifica para pocos aminoácidos básicos en el sitio de corte y quizá carece de un sitio de glicosilación en la posición once. El gen que codifica para la proteína PB1 carece del fragmento PB1-F2, así como en el gen de la PA se encuentra el fragmento PA-X. También se observó, que el gen de la polimerasa contiene la secuencia consenso del ribosoma TCC TTT CGT C, requerida para la expresión de PA-X. Las características moleculares demostraron que el virus corresponde a un virus de baja patogenicidad del subtipo H5 con excepción del posible sitio once de glicosilación. La información del genoma para esta cepa del virus, proveerá un mapa molecular para futuros estudios in vivo que puedan contribuir a conocer por qué algunos virus de influenza aviar persisten en los pollos por periodos prolongados. Esta información puede ser de utilidad en países como México, donde el virus ha estado en la avicultura desde 1994 y con el potencial de evolucionar a virus de alta patogenicidad.

Abstract: The aim of this study was to compare the performance of IFN-γ and IL-4 in mice inoculated with recombinant rabies virus G protein that was expressed either in transgenic maize or baculovirus. For this purpose, groups of mice were inoculated as follows: Group 1, inactivated rabies vaccine im; Group 2, plant-derived recombinant G protein orally; Group 3, baculovirus-expressed G protein im; Group 4, baculovirus-expressed G protein orally; and group 5, untransformed maize orally. The levels of IFN-γ and IL-4 and specific antibodies were evaluated every 15 d. A challenge was performed at d 60 post-inoculation (pi). Groups 1 and 3 promoted the best humoral response. On the other hand, the results showed that the same groups showed the best levels of IFN-γ at d 10 pi; while the pick of IL4 was detected at d 15 pi. For the survival study, 83 % of the mice immunized with inactivated vaccine, maize or im baculovirus extracts survived viral infection. The recombinant rabies G protein expressed in baculovirus promoted IFN-γ and antibodies in a similar way to the inactivated rabies vaccine. In spite of this, mice fed with transgenic maize survived to the challenge at the same percentage than group 3.

Resumen: El objetivo de este estudio fue comparar el comportamiento de IFN-γ e IL-4 en ratones inoculados con proteína G recombinante del virus de la rabia, que se expresa en maíz transgénico o baculovirus. Para este propósito, grupos de ratones se inocularon de la siguiente manera: Grupo 1, vacuna contra el virus de la rabia inactivado vía im; Grupo 2, proteína G recombinante derivada de plantas por vía oral; Grupo 3, proteína G expresada en baculovirus vía im; Grupo 4, proteína G expresada en baculovirus por vía oral; Grupo 5, maíz no transformado por vía oral. Los niveles de IFN-γ e IL-4 y los anticuerpos específicos se evaluaron cada 15 días. El desafío se realizó a los 60 días post inoculación (pi). Los grupos 1 y 3 promovieron una mejor respuesta humoral. Por otro lado, los resultados demostraron que los mismos grupos mostraron los mejores niveles de IFN-γ en el día 10 pi; mientras que la IL-4 se detectó en el día 15 pi. Para el estudio de supervivencia, el 83 % de los ratones inmunizados con vacuna inactivada, maíz y los inoculados im con extractos de baculovirus sobrevivieron la infección viral. La proteína G de la rabia recombinante expresada en baculovirus promovió IFN-γ y los anticuerpos de una manera similar a la vacuna de rabia inactivada. A pesar de esto los ratones alimentados con maíz transgénico sobrevivieron al desafío en el mismo porcentaje que el grupo 3.

OBJECTIVE: To determine the geospatial distribution of bovine paralytic rabies cases transmitted by Desmodus rotundus in the Mexican states of Guanajuato, Querétaro, and San Luis Potosí. METHODS: This was a cross-sectional epidemiological study based on cases reported during statewide campaigns for the control of bovine paralytic rabies in Guanajuato (2008-2013), Querétaro (2005-2013) and San Luis Potosí (2001-2013). All cases were confirmed by direct immunofluorescence. Maps showing the distribution of cases by year and species were constructed using ArcMap version 10.1. To identify areas where conditions favor the appearance of cases, bioclimatic variables were combined with georeferenced cases using MaxEnt version 3.3.3. RESULTS: Of the 1037 cases recorded, 911 (87.9%) occurred in San Luis Potosí, 82 (7.9%) in Querétaro, and 44 (4.2%) in Guanajuato. Of the total number of cases, 87.4% occurred at altitudes of less than 1500 meters above sea level. In Guanajuato and Querétaro, 77.3% and 42.3% of the cases, respectively, occurred at altitudes greater than 1 500 meters above sea level. Peak incidence was recorded from December to March. The V11 antigenic variant of the virus was the most common (173 cases); it was found in all three states. In the endemic channel, the average number of cases remains within the security zone from January to March but exceeds the median value from April to June. The spatial distribution of cases shows that the disease has spread recently, which correlates with the presence of the vampire bat. CONCLUSIONS: Bovine paralytic rabies has spread to areas that were formerly free of the disease. Environmental characteristics and the altitude above sea level do not limit the appearance of cases. Constant monitoring should be conducted for early case detection. Vaccination should take place before the rainy season starts, without waiting for outbreaks to occur.

OBJETIVO:Determinar la distribución geoespacial de los casos de rabia paralítica bovina transmitida por Desmodus rotundus en los estados de Guanajuato, Querétaro y San Luis Potosí, México. MÉTODOS: Estudio epidemiológico transversal a partir de los casos notificados por las campañas estatales de control de la rabia paralítica bovina en Guanajuato (2008-2013), Querétaro (2005-2013) y San Luis Potosí (2001-2013). Se confirmaron los casos por inmunofluorescencia directa. Se elaboraron mapas de distribución de los casos por año y por especie, mediante el software ArcMap versión 10.1. Para identificar áreas con condiciones apropiadas para la presencia de casos se combinaron las variables bioclimáticas con los casos georreferenciados, mediante el programa MaxEnt versión 3.3.3. RESULTADOS: Se registraron 1 037 casos, de los cuales, 911 (87,9%) ocurrieron en San Luis Potosí, 82 (7,9%) en Querétaro y 44 (4,2%) en Guanajuato. Del total, 87,4% ocurrió en alturas menores de 1 500 msnm. En Guanajuato y Querétaro, 77,3% y 42,3% de los casos, respectivamente, ocurrieron en alturas mayores de 1 500 msnm. Los meses de mayor incidencia fueron de diciembre a marzo. La variante antigénica viral V11 fue la más frecuente (173 casos), presente en los tres estados estudiados. En el canal endémico, el promedio de casos se mantiene en la zona de seguridad de enero a marzo, pero de abril a junio excede la mediana. La distribución espacial de los casos muestra la diseminación reciente de la enfermedad, lo que coincide con la presencia del murciélago vampiro. CONCLUSIONES: La rabia paralítica bovina se ha extendido a regiones anteriormente libres de esta enfermedad. Las características ambientales y la altura sobre el nivel del mar no limitan la presentación de casos. Se debe mantener un monitoreo constante para la detección oportuna de casos. La vacunación se debe realizar antes del comienzo de las lluvias, sin esperar la aparición de brotes.

Using integrative epidemiologic techniques, we studied the changing relationships (beta and phylogenetic beta diversity) of multihost systems and virus associations in bat communities in fragmented landscapes from Chiapas, Campeche and Greater Mexico City. We combined computing applications, molecular detection, and nucleotide sequencing of coronaviruses, hantaviruses, paramyxoviruses and pegiviruses with ecological and phylogenetic analyses. A total of 22 viruses were discovered in 1,067 samples from 42 bat species, representing an estimated 78% of all viral richness in the system. Based on 17 virus genotypes discovered with an equal sampling effort, a total viral richness of 23 genotypes was estimated using a Chao2 statistic model. Using a residual model, we categorized host species and habitat types that are prone to harboring higher viral richness. Positive relationships were found between phylogenetic host diversity and both viral diversity (r = 0.41, p < 0.05) and viral richness (r = 0.51, p < 0.05). The beta diversity (the rate of change) of viral communities was explained by host beta diversity (r = 0.86, p < 0.05). To understand the change in viral and host communities, we partitioned beta diversity in nestedness (species loss) and turnover (compositional dissimilarity) components. In Chiapas, the host beta diversity was explained by the nestedness of species composition, while the phylogenetic host diversity was explained by turnover of the host lineages. Campeche showed a high phylogenetic host nestedness and low host turnover. Beta-diversity and beta-phylogenetic diversity indicated that patterns of local species assemblages and regional abiotic features in human-dominated landscapes are significant drivers of viral community composition. Our study represents the first effort in Mexico to study the relationship between viral diversity in bat communities in modified landscapes to understand host-virus relationships.

Mediante análisis epidemiológicos integrales, se estudiaron la diversidad beta (entre sitios) y la beta filogenética de sistemas multi-hospederos, así como los virus asociados con comunidades de murciélagos en paisajes fragmentados de Chiapas, Campeche y la zona metropolitana de la Ciudad de México. Se combinaron aplicaciones computacionales, técnicas de detección molecular y la secuenciación de nucleótidos de coronavirus, hantavirus, paramyxovirus y pegivirus con análisis ecológicos y filogenéticos. Se descubrieron un total de 22 virus en 1 067 muestras pertenecientes a 42 especies de murciélagos, lo que representa una estimación de 78% de la riqueza viral total. Al aplicar el modelo estadístico Chao2 con datos de los 17 genotipos de virus encontrados con el mismo esfuerzo de muestreo, se calculó una riqueza viral de 23 genotipos. Usando un modelo con residuales, se categorizó a las especies hospederas y los tipos de hábitat que tienen mayor riesgo de asociarse con una mayor riqueza viral. Se encontró una relación positiva entre la diversidad filogenética de los hospederos y la diversidad viral (r = 0.41, P < 0.05) y con la riqueza viral (r = 0.51, P < 0.05). La diversidad beta (tasa de recambio) de las comunidades de virus se explicó por la diversidad beta de los hospederos (r = 0.86, P < 0.05). Para entender los patrones de cambio en las comunidades virales y de hospederos, la diversidad beta se dividió en: un componente de anidamiento -pérdida de especies- y uno de recambio -disimilitud en la composición-. En Chiapas, la diversidad beta de los hospederos se justificó por la anidación de especies, mientras que la diversidad beta filogenética se definió por el recambio de linaje de los hospederos. Campeche mostró altos valores de anidamiento filogenético y bajo recambio de hospederos. La diversidad beta y la diversidad beta filogenética indicaron que los patrones locales de la estructura de las comunidades de hospederos y las características abióticas regionales en paisajes dominados por actividades antropogénicas son un factor importante en la determinación de la composición de comunidades virales. Este estudio representa el primer esfuerzo en México para entender las relaciones hospedero-virus, a través del estudio de las relaciones entre la diversidad viral y las comunidades de murciélagos en paisajes transformados.

The objective of this work was to characterize molecularly rabies viruses from Mexican skunks, by comparison of a portion of the viral P gene sequence with corresponding regions from other skunk-adapted rabies virus variants and with other genotype 1 rabies viruses that circulate in the Americas. Furthermore, incubation period and histopathologic lesions after virus inoculation by the intra-cerebral route in mice was characterized. According to the results of phylogenetic studies the Mexican skunk strains (Antigenic Variant (AV) 8 and AV10) are evolutionarily quite distinct. The AV10 isolate from South Baja California is quite closely related to the viruses that circulate in Californian skunks; while the AV8 isolate from San Luis Potosí was most closely related to the South central skunk strain that circulates in southern states such as Texas. These variations were reflected in some biological properties of both strains in mice.

El objetivo de este estudio fue la caracterización molecular y biológica del virus de la rabia en zorrillos de México, comparando una porción de la secuencia viral del gen P, con regiones correspondientes de variantes de virus rábico adaptadas en zorrillos y pertenecientes al genotipo 1 (virus de la rabia "clásica"), que circulan en América. Como parte de la caracterización biológica se incluyó el periodo de incubación y las lesiones histopatológicas después de la inoculación del virus por vía intracerebral en ratones. De acuerdo a los resultados de estudios filogenéticos, las cepas de zorrillo mexicano (variante antigénica (AV8 y AV10) son muy distintas en cuanto a su evolución. El aislado AV10 de Baja California Sur está muy relacionado con los virus que circulan en zorrillos de California; mientras que el aislado AV8 de San Luis Potosí tuvo mayor relación con la cepa del zorrillo del Centro/Sur que circula en los estados del sur, como Texas. Estas variantes se reflejaron en algunas propiedades biológicas de ambas cepas en ratones.

Cloning and heterologue expression of antigens to pathogenic agents which affect humans and animals is an effective way of producing subunitary vaccines. An analysis was done of stable expression of the E gene coding for the West Nile Virus (WNV) envelope (E) glycoprotein in corn type II embryogenic callus transformed with biobalistics using the constitutive CAMV35S promoter. This protein is responsible for WNV immunity induction. Transgene expression in transformed calluses with the WNV E glycoprotein was identified by RT-PCR. Western Blot was used to verify protein expression with total soluble protein (TSP) extracts from the transformed calluses. A 68 kDa protein was identified and 0.86 % TSP attained. This WNV E glycoprotein production system allows production of this protein in almost half the time of conventional techniques, a significant advance in experimental immunological design. This is the first time that this kind of evaluation was done. We suggest evaluating the transformed embryogenic calluses in animals by oral route in order to test its efficacy as a candidate of vaccine.

La clonación y expresión heteróloga de antígenos de agentes patógenos que afectan humanos y animales, ha demostrado ser una buena alternativa para la obtención de vacunas subunitarias. En este estudio se analiza la expresión estable del gen E que codifica la glicoproteína de envoltura del virus del Oeste del Nilo (VON) en callos embriogénicos de maíz, que fueron transformados mediante biobalística empleando el promotor constitutivo CAMV35S. La expresión del transgen fue determinada mediante RT-PCR en los callos embriogénicos de maíz transformados con la secuencia codificante de la glicoproteína E del VON. Para verificar la expresión de la proteína se realizó un Western blot con extractos de la proteína soluble total (PST) de los callos transformados. De esta manera se identificó una proteína de 68 kDa. Empleando este sistema de expresión se pudo obtener un 0.86 % de PST. En este estudio por primera vez se analiza la expresión de la glicoproteína E del virus del Oeste del Nilo en callos embriogénicos de maíz. Siendo la glicoproteína E del VON la responsable de la inducción de la inmunidad en contra de este virus, esta investigación representa un avance importante en el diseño de un inmunógeno experimental, que permitiría iniciar estudios en animales de laboratorio, con la finalidad de obtener una vacuna prototipo para la prevención y el control de la infección por el VON.